MITA介导的细胞抗病毒反应信号转导及其调节机制

1 (p1): 第一章 研究背景
1 (p1-1): 第一节 抗病毒天然免疫概述
1 (p1-1-1): 一、天然免疫简介
3 (p1-1-2): 二、抗病毒天然免疫反应信号转导概述
5 (p1-1-3): 三、Ⅰ型干扰素转录激活机制
11 (p1-2): 第二节 PRRs及其介导的天然抗病毒免疫反应信号转导
11 (p1-2-1): 一、识别病毒的模式识别受体及其对病毒的识别
31 (p1-2-2): 二、PRRs协同作用介导细胞抗病毒反应
34 (p1-2-3): 三、PRRs介导的细胞抗病毒反应信号转导
45 (p1-3): 第三节 PRRs介导的信号转导的调节机制
49 (p1-3-1): 一、阻断介导信号转导的分子间的相互作用
50 (p1-3-2): 二、降解介导信号转导的蛋白
51 (p1-3-3): 三、调节信号分子的去泛素化
52 (p1-3-4): 四、其他
54 (p2): 第二章 实验材料与实验方法
54 (p2-1): 第一节 实验材料
54 (p2-1-1): 一、荧光素酶报告基因实验相关材料
54 (p2-1-2): 二、细胞、细胞因子与细胞培养
55 (p2-1-3): 三、载体构建所需材料
55 (p2-1-4): 四、酵母双杂交所需材料
55 (p2-1-5): 五、免疫共沉淀以及Western blot实验相关材料
56 (p2-2): 第二节 实验方法
56 (p2-2-1): 一、质粒构建、DNA纯化、磷酸钙沉淀转梁293细胞、免疫共沉淀、Western blot与RNA blot
57 (p2-2-2): 二、荧光素酶报告基因实验
57 (p2-2-3): 三、表达克隆筛选
57 (p2-2-4): 四、酵母双杂交实验
60 (p2-2-5): 五、亚细胞器分离实验
60 (p2-2-6): 六、RT-PCR实验
61 (p2-2-7): 七、VSV空斑实验
61 (p2-2-8): 八、泛素化实验
62 (p2-2-9): 九、LC-MS/MS鉴定MITA磷酸化位点
62 (p2-2-10): 十、免疫荧光与激光共聚焦显微镜观察
62 (p2-2-11): 十一、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
63 (p2-2-12): 十二、原代细胞的培养与转染
64 (p2-2-13): 十三、32P in vivo标记细胞与放射自显影实验
64 (p2-2-14): 十四、体外泛素化实验
65 (p3): 第三章 实验结果与讨论
65 (p3-1): 第一节 MITA介导的信号转导机制
65 (p3-1-1): 一、研究背景与立项依据概述
66 (p3-1-2): 二、MITA的鉴定与表达分析
66 (p3-1-3): 三、过表达MITA能有效激活IRF3
68 (p3-1-4): 四、RNAi下调MITA的表达抑制SeV诱导的IFN-β的表达
72 (p3-1-5): 五、MITA定位于线粒体
78 (p3-1-6): 六、MITA与VISA、RIG-I相互作用
82 (p3-1-7): 七、MITA作为支架蛋白促进TBK1-IRF3的相互作用
86 (p3-1-8): 八、TBK1介导MITA的磷酸化促进MITA对IRF3的激活
88 (p3-1-9): 九、小结与讨论
92 (p3-2): 第二节 RNF5对MITA介导信号转导的调节
92 (p3-2-1): 一、研究背景和立项依据概述
92 (p3-2-2): 二、RNF5是MITA相互作用蛋白
95 (p3-2-3): 三、过表达RNF5抑制病毒感染引起的IFN-β的激活
99 (p3-2-4): 四、RNAi下调RNF5的表达促进病毒感染引起的IFN-β的激活
101 (p3-2-5): 五、RNF5在MITA水平调节细胞抗病毒反应
104 (p3-2-6): 六、RNF5催化MITA泛素化降解
108 (p3-2-7): 七、RNF5催化MITA泛素化发生在MITA K150
109 (p3-2-8): 八、RNF5在线粒体泛素化MITA
111 (p3-2-9): 九、小结与讨论
112 (p3-3): 第三节 RNF5催化VISA泛素化降解
112 (p3-3-1): 一、研究背景与立项依据概述
113 (p3-3-2): 二、病毒感染诱导RNF5与VISA相互作用
113 (p3-3-3): 三、RNF5诱导VISA通过泛素-蛋白酶体途径降解
118 (p3-3-4): 四、RNF5泛素化VISA发生在K361和K462
119 (p3-3-5): 五、RNF5对VISA的泛素化独立于Itch
121 (p3-3-6): 六、小结与讨论
123 (p3-4): 第四节 研究总结与展望
125 (p4): 参考文献
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